Цэнтрыфужная трубка - гэта простая трубка, якая можа вытрымліваць высокую хуткасць кручэння і ціск, напрыклад, для аддзялення некаторых узораў і аддзялення ападкаў супернатанта.Ультрафільтрацыйная цэнтрыфужная трубка мае дзве часткі, падобныя на ўнутраную трубку і вонкавую трубку.Унутраная трубка ўяўляе сабой мембрану з пэўнай малекулярнай масай.Падчас высакахуткаснага цэнтрыфугавання рэчывы з меншай малекулярнай масай будуць выцякаць у ніжнюю трубку (г.зн. вонкавую трубку), а тыя з большай малекулярнай масай будуць захоплівацца ў верхнюю трубку (г.зн. ва ўнутраную трубку).Гэта прынцып ультрафільтрацыі і часта выкарыстоўваецца для канцэнтрацыі проб.
Ультрафільтрацыйныя цэнтрыфужныя прабіркі звычайна можна выкарыстоўваць без папярэдняй апрацоўкі, але для апрацоўкі ўзораў бялку, асабліва для разведзеных бялковых раствораў (< 10 мкг / мл), хуткасць аднаўлення канцэнтрацыі з ультрафільтрацыйнымі мембранамі часта не з'яўляецца колькаснай.Нягледзячы на тое, што матэрыялы PES мінімізуюць неспецыфічную адсорбцыю, некаторыя вавёркі, асабліва калі яны разведзеныя, могуць мець праблемы.Ступень неспецыфічнага звязвання вар'іруецца ў залежнасці ад структуры асобных бялкоў.Вавёркі, якія змяшчаюць зараджаныя або гідрафобныя дамены, часцей за ўсё незваротна звязваюцца з рознымі паверхнямі.Папярэдняя апрацоўка пасівацыі на паверхні ультрафільтрацыйнай цэнтрыфужнай трубкі можа паменшыць страту адсорбцыі бялку на паверхні мембраны.У большасці выпадкаў папярэдняя апрацоўка калонкі перад канцэнтраваннем разведзенага бялковага раствора можа палепшыць хуткасць аднаўлення, таму што раствор можа запоўніць пустыя месцы адсорбцыі бялку, адкрытыя на мембране і паверхні.Метад пасівацыі заключаецца ў папярэднім замочванні калонкі вялікім аб'ёмам раствора для пасівацыі больш чым на 1 гадзіну, дбайным прамыванні калонкі дыстыляванай вадой, а затым цэнтрыфугаванні ў дыстыляванай вадзе для поўнага выдалення раствора для пасівацыі, які можа застацца на плёнцы. .Будзьце асцярожныя, каб плёнка не высахла пасля пасівацыі.Калі вы хочаце выкарыстоўваць яго пазней, вам трэба дадаць стэрыльную дыстыляваную ваду, каб плёнка заставалася вільготнай.
Ультрафільтрацыйныя цэнтрыфужныя прабіркі звычайна нельга стэрылізаваць і выкарыстоўваць паўторна.Паколькі цана адной трубкі нятанная, многія людзі спрабуюць выкарыстоўваць яе паўторна - вопыт паказвае, што паверхню мембраны трэба шмат разоў чысціць дыстыляванай вадой і адзін-два разы центрифугировать.Маленькую прабірку, якую можна адцэнтрыфугаваць у зваротным кірунку, можна пагрузіць у дыстыляваную ваду, а затым адцэнтрыфугаваць у зваротным кірунку больш разоў, што будзе лепш.Ён можа быць выкарыстаны для аднаго і таго ж узору шматкроць і можа быць замачаны ў дыстыляванай вадзе, калі ён не выкарыстоўваецца, але бактэрыяльнае заражэнне павінна быць прадухілена.Не змешвайце розныя ўзоры.Некаторыя людзі кажуць, што замочванне ў 20% спірце і 1n NaOH (гідраксід натрыю) можа прадухіліць рост бактэрый і прадухіліць высыханне.Пакуль ультрафільтрацыйная мембрана пранікае ў ваду, ёй нельга дапусціць высыхання.Аднак іншыя кажуць, што гэта разбурыць структуру мембраны.У любым выпадку вытворцы звычайна не падтрымліваюць паўторнае выкарыстанне.Паўторнае выкарыстанне блакуе памер пор мембраны фільтра і нават выклікае ўцечку вадкасці, што паўплывае на вынікі эксперыментаў.
Час публікацыі: 5 верасня 2022 г